大肠杆菌与沙门氏菌鉴定

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08动检1班：魏 静尚延丽李盼盼崔亚婷

翟阿官

田方方

一、 实验目的与要求

1、 通过本实验了解大肠杆菌及沙门氏菌的主要生化特性与培养特性

2、 掌握大肠杆菌与沙门氏菌的鉴别方法

二、 实验器材及试剂

温箱、显微镜、载玻片、营养琼脂、接种环、灭菌平皿、麦康凯培养基、无菌试管、伊红美兰培养基、三糖铁培养基、革兰氏染色剂、棉签、火柴等

三、 实验内容

1、 直接镜检法：

1） 操作步骤：

a）用棉签沾取适量样液直接涂在载玻片上

b）用革兰氏染色剂染色

c）显微镜下观察

2）预期实验结果：

a）大肠杆菌：大肠杆菌为革兰氏阴性菌，中等大小，两端略圆的短粗杆菌，成单个存在，也有成双排列；周身鞭毛，能运动，有时两端着色较浓，要注意与巴氏杆菌区分开来。

b）沙门氏菌：沙门氏菌也为革兰氏阴性菌，无芽孢，大小通常为0.7~1.5um*2.0~5.0um，菌端钝圆，散在，偶有短丝状，无荚膜，除鸡白痢沙门氏菌和鸡伤寒沙门氏菌外均有周身鞭毛，能运动，绝大多数菌株有菌毛。

2、 分离培养法：

将样液分别划线接种在麦康凯培养基、伊红美兰培养基上，温箱培养24h后观察生长情况，根据菌落的形态、颜色、大小等方面的差异来鉴别大肠杆菌和

沙门氏菌。

1） 麦康凯培养基（预期实验结果）：

a） 大肠杆菌：鲜桃红色或微红色，菌落中心呈深桃红色，圆形，扁平，边缘整齐，表面光滑，湿润；

b） 沙门氏菌：无色至浅橙色，透明或半透明，菌落中心有时为暗色。

2） 伊红美兰培养基（预期实验结果）：

a） 大肠杆菌：紫黑色菌落，有的有金属光泽

b） 沙门氏菌：形态特征与在麦康凯培养基上的相似

2、 三糖铁培养基穿刺试验

1） 操作方法：

将待检样液穿刺接种于三糖铁培养基中，培养18~24h后，取出观察

2）预期实验结果：

a）大肠杆菌：穿刺后不变黑，表面呈黄色

b）沙门氏菌：穿刺底部有气体，穿刺后变黑，中间为黄色表面为红色

3、乳糖发酵试验

1）操作方法：

将待检样液接种于乳糖发酵管内放于温箱内培养18h后，观察结果

2) 预期实验结果：

a）大肠杆菌：产酸产气

b）沙门氏菌：不产酸产气